MMLV Reverse Transcriptase

2024-07-10 11:23






   提高MMLV逆转录酶的热稳定性





MMLV绘图 热稳定性.png

图1


MMLV绘图 建库产量.png

图2




结果分析:

  • 基于MTPS筛选,获得热稳定性高远优于亲本的MMLV突变体;

  • 相较于野生型WT,突变体的Tm值提高了5℃。且cDNA产量图表明,M-MLV突变体188,305同样表现出优秀的合成cDNA的能力(图1);

  • M-MLV突变体在6个月和12个月的预混液中均展现出比WT对照更高的建库产量。特别是,12个月预混的产量比6个月的还要高,说明长期预混并未降低其建库效率,反而可能有所提升(图2)。








   提高MMLV逆转录酶的酶活性





图3




结果分析:

  • 基于MTPS筛选,获得cDNA产量提升2倍及以上的突变体

  • 相较于母本,大多数突变体的cDNA产量比母本提高2倍以上。其中,突变体M11的cDNA产量提高近3倍(图3)







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