产品上新|长片段cDNA合成难题破解!超低 RNase H活性反转录酶重磅上新!

2025-06-09 09:56 Molefuture

继镁孚泰高特异性MMLV反转录酶(Cat.No.LT001-01)以“高RNA依赖活性+低DNA依赖活性”解决非特异性扩增难题后(点击了解),镁孚泰MMLV反转录酶筛选试剂盒再添创新力作——Longscript MMLV RTase Screening Kit(Cat.No.LT002-01)!这款专为长片段cDNA合成设计的产品,通过极致降低RNase H活性,显著提升模板利用率,攻克长链RNA反转录过程中的模板降解难题,助力基因表达分析、cDNA文库构建、RNA测序等前沿研究迈向更高精度!



反转录酶的RNase H活性

RNase H活性是反转录酶的一个固有特性,指其特异性水解 DNA-RNA 杂合链中 RNA 链的能力。在反转录过程中,以RNA为模板合成的互补DNA(cDNA)会与模板RNA形成DNA-RNA杂合链。RNase H活性可识别并切割杂合链中的RNA链,使cDNA单链暴露出来,为后续的反应,如第二链cDNA的合成等提供条件。


但如果RNase H活性较强,在cDNA合成过程中,RNA模板可能会在cDNA合成完成之前就被降解,导致cDNA链的长度较短,所以RNase H活性是长片段cDNA合成过程中需要规避的因素。此外,RNase H活性还可能会与反转录酶中的聚合酶活性竞争,从而降低反转录效率。以上特性极大的影响了基因表达分析、cDNA文库构建、RNA测序等实验研究的精准性。比如在RNA测序实验中,需要获得高质量、完整的cDNA文库。高RNase H活性可能会破坏RNA模板,影响cDNA文库的构建质量,导致测序结果的准确性降低,无法准确反映原始RNA的表达情况和序列信息。


图1.RNase H活性的影响。


镁孚泰长片段合成MMLV反转录酶筛选试剂盒

为了提高长片段cDNA合成效率,提升实验结果的准确性,镁孚泰生物依托ZymeEditor定向进化平台,融合五大酶改造技术,特别开发了一款长片段合成MMLV反转录酶筛选试剂盒——Longscript MMLV RTase Screening Kit(Cat.No.LT002-01)。该试剂盒包含10种长片段合成MMLV反转录酶突变体,它们均在MMLV野生型反转录酶的基础上通过定向进化技术改造,实现 RNase H 活性的显著降低,有效提升 cDNA 产量与长片段合成效率,为全长 cDNA 获取等提供优质模板,大幅提升后续研究的准确性。


图2:镁孚泰生物 ZymeEditor 平台五大酶改造技术。


RNase H/RDDP活性比值显著低于WT

如图3数据所示,与野生型(Wild type,WT)相比,镁孚泰长片段合成MMLV反转录酶筛选试剂盒(Cat.No.LT002-01)中10种突变体的RNase H/RNA依赖的DNA聚合酶活性(RDDP)活性比值均显著降低,大部分突变体的该比值仅为WT的20%以下,展现了突变体在相同聚合酶活性下,具有极低的RNase H活性。


图3:以WT的RNase H活性与RDDP活性的比值为100%,镁孚泰长片段MMLV反转录酶筛选试剂盒(Cat.No.LT002-01)10种酶相对WT的RNase H/RDDP活性比值数据图。


产品信息

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关于镁孚泰生物



镁孚泰生物科技(上海)有限公司(镁孚泰生物,Molefuture)是翌圣生物科技(上海)股份有限公司旗下的全资子公司,是一家以酶进化技术为驱动、专注于提供酶改造定制化解决方案的创新型企业。依托于翌圣生物,镁孚泰生物现有六大技术平台:ZymeEditorTM创新型酶进化平台、多宿主高效表达平台、发酵工艺开发平台、纯化工艺开发平台、UCF.ME®超洁净酶生产平台以及酶分析与质控平台。基于这六大技术平台,镁孚泰生物可提供酶定向改造、新酶开发、酶工艺开发以及GMP级别规模化生产的全套定制解决方案,以满足酶在体外诊断、生物医药、合成生物、医疗美容、医药中间体等领域的应用需求。


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