结果分析:
利用FADS平台自主开发了适用于T7 RNA聚合酶的超高通量筛选方法,可通过液滴荧光强度指示dsRNA含量(图1)。
利用ELISA方法对RNA产物中的dsRNA进行定量分析,结果显示突变体均表现出更低的dsRNA含量。其中,突变体M5的dsRNA含量相较于野生型WT减少了98%,较竞品减少了78%(图3-a)。
Dot blot可视化dsRNA半定量测试结果与ELISA结果一致(图3-b)。
相关专利:
CN 2024104181762 T7 RNA 聚合酶突变体及其应用
相关文献:
《FADS and semi-rational designmodified T7 RNA polymerase reduced dsRNAproduction, with lower terminaltransferase and RDRP activities》(了解详情)